Lesiones Intraepiteliales Escamosas Cervicales

Artículos Originales

Búsqueda del Marcador de Progresión p16INK4a en las Lesiones Intraepiteliales Escamosas Cervicales en Mujeres de Cartagena de Indias1

Search for The Progression Marker p16INK4a in Squamous Intraepithelial Lesions, in Women from Cartagena de Indias1

Álvarez Coneo Álvaro2
Barrios García Lía3
Borré Arrieta Orlando4
Arzuza Navarro Octavio5
Correspondencia: alalvcon@gmail.com
Recibido para evaluación: septiembre 30 2010
Aceptado para publicación: octubre 30 2010

Resumen

Introducción y objetivo:

Numerosos marcadores han sido utilizados en el estudio de la displasia cervical, en este grupo se destaca p16INK4a, una proteína que inhibe las quinasas dependientes de ciclinas 4 y 6 por lo que se considera supresor de tumores.

Se ha observado inactivación de esta proteína en cánceres y se ha asociado su sobreexpresión en las lesiones cervicales precursoras. Este estudio busca demostrar la presencia del marcador p16INK4a en Lesiones Intraepiteliales Escamosas diagnosticadas por biopsia como indicador de riesgo de progresión, de las lesiones de bajo grado, a lesiones de alto grado y cáncer.

Materiales y métodos:

Fueron seleccionadas 37 biopsias de pacientes con Lesión intraepitelial escamosa de bajo o alto grado, que asistieron a consulta de colposcopia en la Clínica de Maternidad Rafael Calvo, con resultado de citología anormal, entre marzo 2006 – 2008.

La colposcopia se realizó con el equipo MORREL con zoom de aumento de 4x a 40x y la biopsia se informó según Richard (NIC I-NIC II Y NIC III) homologada e.g. Bethesda 2001 (Lesión Intraepitelial Escamosa de Bajo Grado y de Alto Grado. LIE). Para la inmunohistoquímica, se tomaron cortes (4 μm) desparafinados a los que se agregó anticuerpo monoclonal anti- p16INK4a, dilución 1:20 (Clon E6H4, Dako Cytomation), y se reveló la reacción con un sistema de estreptavidina peroxidasa.

El contraste se realizó con Hematoxilina. Se interpretó según los criterios de Klaes. Los datos fueron analizados con SPSS 12.0. X2 se utiliza para determinar diferencias significativas entre los resultados de la colposcopia, la biopsia y la inmunohistoquímica.

Resultados:

De los 37 casos, 24 fueron positivos al marcador (45,5%) en LIE de bajo grado y 93,3% en LIE alto grado. La presencia del marcador se correlacionó significativamente con las LIE alto grado evaluadas por biopsia (Gold-standard). Conclusiones: p16INK4a se encuentra presente en el epitelio con displasia cervical, sobre todo en las Lesiones de Alto Grado. Las Lesiones de bajo grado positivas para marcador p16 posiblemente tienen mayor riesgo de evolucionar a lesiones de alto grado y cáncer. Rev.cienc.biomed.2010; 1 (2): 208 – 216

Palabras Claves:  p16INK4a. Lesión Intraepitelial Escamosa de Bajo y Alto Grado. Carcinoma de cervix. Virus del Papiloma Humano de alto riesgo VPH-AR.

Summary

Introduction and objective:

Numerous markers have been used in the diagnosis of squamous intraepithelial lesion; in this group is included p16INK4a, an important protein that inhibits ciclyns 4 and 6 dependant of quinases, reason it is considered a potent suppresor of tumors.

Inactivación of this protein has been observed in patients with cancer and its overexpression has been related to improve prognosis and interpretation of the cervical biopsy.

Materials and methods:

For this study 37 patients, with abnormal cytology, who attended consultation of colposcopy in the Clínica de Maternidad Rafael Calvo (CMRC) were selected, between March 2007 – 2008, for colposcopic, histological and immunohistochemical studies.

For colposcopy MORREL equipment was used, with zoom lens of 4x to 15x and sample for the biopsy was reported according to Richard (CIN I-CIN II AND CIN III) accredited e.g. Bethesda: Squamous Intraepithelial Lesions of Low Degree and High Degree L-SIL and H-SIL .

For immunohistochemical analysis, biopsy sample 4 μm sections desparafinized, treated with monoclonal antibody anti p16INK4a 1:20 dilution, were taken (Clone E6H4, Dako Cytomation). Reaction was revealed with a streptavidin peroxidase system. Contrastation was made with hematoxylin, Data were analyzed with SPSS 12.0. X2 was used to determine significant differences between results of colposcopy, biopsy and immunohistochemical test.

Results:

Of the 37 cases, 24 were positive to the marker (45,5 %) in L-SIL and 93,3 % in H-SIL. The presence of the marker significantly correlated with the L-SIL diagnosed by Biopsia (Gold-standard) (p≤0.05). Conclusions: p16INK4a is a useful marker in early prognosis of L-SIL that could progress to cancer.

Keywords:  p16INK4a. H-SIL. L-SIL. Cervical cancer. HR-HPV.

Introducción

En cérvix se han identificado marcadores funcionales como inhibidores dependiente de la ciclinquinasa -2A, p16INK4a y el RNA mensajero de los genes E6 y E7 (mRNA E6/ E7), Ki-67, p53, pRb y citoqueratinas-14, -13 y- laminina-5 (1, 2).

Los marcadores Ki-67 y p16INK4a utilizados en lesiones intraepiteliales cervicales pueden distinguir entre una lesión intraepitelial cervical y cambios reactivos celulares, constituyéndose en una herramienta de la patología quirúrgica (3,4) y que la sobreexpresión de p16INK4a es de valor diagnóstico en las neoplasias intraepiteliales asociadas a VPH de alto riesgo (5, 6, 15,16).

También se han descrito la expresión de p16INK4a, p14ARF y p53 como marcadores útiles en lesiones cervicales y cáncer (7). Varios estudios se refieren al valor de la detección por inmunohistoquímica del marcador p16INK4a (5, 6, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14), como el marcador más útil en displasias y cáncer cervical.

Lea También: Lesiones Intraepiteliales Escamosas Cervicales: Metodología

Lesiones Premalignas con la consiguiente prevención del Cáncer Cervical

La búsqueda de lesiones premalignas con la consiguiente prevención del cáncer cervical se hace con el tamizaje por citología, con posterior remisión a colposcopia con biopsia dirigida. Aunque las características citohistológicas y colposcópicas asociadas a infección por VPH se encuentran identificadas y bien descritas, son subjetivas en el diagnóstico (20).

La variabilidad interobservador ha sido ampliamente definida sobre todo en lo que se refiere a las Lesiones de Bajo Grado, (21, 22, 23). La morfología no es una herramienta precisa y carece de valor predictivo en el desarrollo ulterior de cáncer. De igual manera ocurre con las imágenes colposcópicas. La biopsia es el Gold standard para el diagnóstico y toma de decisiones en el tratamiento.

El estudio colposcópico es de vital importancia para la localización de lesiones y toma de muestra para biopsia. Unido a esto la determinación inmunohistoquímica de p16INK4a más una tipificación con DNA de VPH de alto riesgo aportaría información de vital importancia. para orientar el tratamiento de las lesiones con real riesgo de progresión.(24, 25,26,27, 28,29,30,31,16,17,18,19).

El objetivo de esta investigación fue detectar la presencia del marcador de progresión p16INK4a, para determinar el riesgo de progresión en las lesiones intraepiteliales escamosas de bajo grado (10, 12, 32, 33, 34,35).