Apoptosis Inducida por Inmunosupresores y su Modulación por Anión Superóxido

Producción de O2
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D.P. Gil, M.T. Rugeles, P. Patiño, M. Rojas
Laboratorio de Inmunología y Laboratorio Central de Investigaciones,
Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia.
e-mail: dipagileudoramail.com.

Introducción

La ciclosporina A (CsA) y la dexametasona (DXM) son drogas inmunosupresoras que han sido ampliamente utilizadas en la terapia de trasplantes y en el tratamiento de varias alteraciones inmunes.

Encuesta sobre Vehículos en Colombia 🚘 🛣️

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Gracias por participar en esta encuesta. Su opinión es muy valiosa para conocer la percepción que tienen los consumidores sobre diferentes marcas de vehículos en Colombia. La encuesta es anónima y sus respuestas serán utilizadas únicamente con fines de investigación de mercado.

⏰ Duración estimada: 5 minutos.

Por favor, responda con sinceridad.

1. Ciudad de residencia*

Si no aparece su ciudad, por favor especifique cuál. 

1. Ciudad de residencia*

Si no aparece su ciudad, por favor especifique cuál. 

2. Género   *

2. Género   *

3. Edad*

3. Edad*

4. Estrato socioeconómico (NSE)*

4. Estrato socioeconómico (NSE)*

5. ¿Cuál es la primera marca que viene a su mente cuando piensa en vehículos?

5. ¿Cuál es la primera marca que viene a su mente cuando piensa en vehículos?

6. ¿Qué otras marcas de vehículos vienen a su mente?

6. ¿Qué otras marcas de vehículos vienen a su mente?

7. ¿Qué otras marcas de vehículos (Camionetas, SUV, automóviles, pickups / camionetas de platón) vienen a su mente?

7. ¿Qué otras marcas de vehículos (Camionetas, SUV, automóviles, pickups / camionetas de platón) vienen a su mente?

8. De las siguientes marcas de vehículos, ¿cuáles recuerda haber visto o escuchado?*

8. De las siguientes marcas de vehículos, ¿cuáles recuerda haber visto o escuchado?*

9. ¿Qué tanto conoce cada una de estas marcas de vehículos?*

Por favor responda sobre cada marca.

9. ¿Qué tanto conoce cada una de estas marcas de vehículos?*

Por favor responda sobre cada marca.

Nada Conocido
Algo conocido
Muy conocido
Chery
Changan
Deepal
BYD
Geely
Great Wall
Jetour
MG
Zeekr

10. ¿De qué marca de vehículos recuerda haber visto, escuchado o leído publicidad recientemente?*

10. ¿De qué marca de vehículos recuerda haber visto, escuchado o leído publicidad recientemente?*

11. ¿De qué otras marcas de vehículos ha visto publicidad?

11. ¿De qué otras marcas de vehículos ha visto publicidad?

12. ¿En qué lugar o medio recuerda haber visto, leído o escuchado sobre estas marcas?

Chery - Changan - Deepal - BYD - Geely - Great Wall - Jetour - MG - Zeekr

12. ¿En qué lugar o medio recuerda haber visto, leído o escuchado sobre estas marcas?

Chery - Changan - Deepal - BYD - Geely - Great Wall - Jetour - MG - Zeekr

13. ¿Qué tanta publicidad ha visto de cada marca?*

Por favor responda sobre cada marca.

13. ¿Qué tanta publicidad ha visto de cada marca?*

Por favor responda sobre cada marca.

Nada
Poca
Mucha
Chery
Changan
Deepal
BYD
Geely
Great Wall
Jetour
MG
Zeekr
14. ¿Qué tan familiarizado(a) está con estas marcas?

Chery*

Chery*

Changan*

Changan*

Deepal*

Deepal*

BYD*

BYD*

Geely*

Geely*

Great Wall*

Great Wall*

Jetour*

Jetour*

MG*

MG*

Zeekr*

Zeekr*

15. ¿Qué palabras o atributos asocia con estas marcas?

Chery

Chery

Changan

Changan

Deepal

Deepal

BYD

BYD

Geely

Geely

Great Wall

Great Wall

Jetour

Jetour

MG 

MG 

Zeekr

Zeekr

16. ¿Cuál es su percepción general de estas marcas?*

16. ¿Cuál es su percepción general de estas marcas?*

Negativa
Neutral
Positiva
Chery
Changan
Deepal
BYD
Geely
Great Wall
Jetour
MG
Zeekr

17. ¿Ha comprado vehículos de estas marcas anteriormente?*

17. ¿Ha comprado vehículos de estas marcas anteriormente?*

No
Chery
Changan
Deepal
BYD
Geely
Great Wall
Jetour
MG
Zeekr

18. ¿Qué tan probable es que compre un vehículo de estas marcas en el futuro?*

18. ¿Qué tan probable es que compre un vehículo de estas marcas en el futuro?*

Muy improbable
Algo probable
Muy probable
Chery
Changan
Deepal
BYD
Geely
Great Wall
Jetour
MG
Zeekr

Estudios previos indican que el efecto inmunosupresor de la DXM podría deberse en parte a la inducción de apoptosis en células inmunes. Mientras que las evidencias experimentales que asocian la CsA y la inducción de apoptosis en el sistema inmune aún son controversiales.

Nuestro objetivo fue determinar si la DXM y la CsA inducían apoptosis en células mononucleares de sangre periférica humana (CMSP) activadas con PHA y si la producción de anión superóxido (O2-) era una de las vías desencadenantes de este fenómeno.

Además se evaluó el efecto de dos antioxidantes, el ácido ascórbico (AA) y la N-acetilcisteína (NAC) sobre la proliferación, la activación celular, la inducción de apoptosis y la producción de O2-

Materiales y métodos

El efecto de las drogas inmunosupresoras y de los antioxidantes sobre la proliferación celular se evaluó por medio de la técnica de incorporación de timidina tritiada después de cultivar las CMSP durante 72 h. Para determinar el número de células apoptóticas se utilizaron las técnicas de incorporación de bromuro de etidio (hipoloidía) y de TUNEL, que fueron leídas por medio de citometría de flujo.

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La producción de O2- y la activación celular también se analizaron por medio de citometría de flujo, la primera mediante la oxidación de hidroetidina a bromuro de etidio y la segunda mediante la expresión de CD69.

Resultados

Las concentraciones de DXM y CsA que inhibieron la proliferación en un 80% aproximadamente fueron 1 x 10-7 M y 1 g/ml respectivamente. Con respecto a los antio-xidantes las concentraciones que recuperaron la proliferación en forma significativa fueron 3.1 mM y 1 mM para la NAC y el AA respectivamente.

Las CMSP tratadas con DXM o CsA presentaron un aumento significativo de la respuesta apoptótica. La cual aumentó notablemente cuando las células fueron tratadas con los inmunosupresores y activadas poste-riormente con PHA (80% para DXM y 90% para CsA). Una respuesta similar se observó en la producción de O2-: aumentó a 70% para DXM y a 40% para CsA.

El tratamiento con AA o NAC previno el aumento de la apoptosis y la produ-cción de O2-. Además, la expresión de CD69 y la respuesta proliferativa de CMSP pretratadas con DXM o CsA y activadas posteriormente fueron parcialmente restauradas por ambos antioxidantes.

(Lea También: La Respuesta Inmune Humoral a la Proteína KMP-11 en Pacientes con Leishmaniasis Americana y Enfermedad de Chagas)

Conclusiones

CMSP pretratadas con las drogas inmunosupresoras y estimuladas con PHA sufren apoptosis y aumentan la producción de O2-.

La apoptosis inducida por activación en CMSP preincubadas con CsA fue 100% dependiente de la producción de O2-. Mientras que la apoptosis inducida por DXM fue parcialmente dependiente de éste. Sugiriendo la existencia de otras vías apoptóticas independientes a las inducidas por el O2-.

El AA y la NAC inhiben la producción de O2- y consecuentemente previenen la apoptosis inducida por DXM o CsA en CMSP activadas con PHA. Permitiendo que la activación celular y la respuesta proliferativa sean restauradas parcialmente en el caso de las células pretratadas con CsA.

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Producción De O2, Apoptosis Inducida Por Inmunosupreso