Determinación de Fosfolípidos que Contienen Colina

Schosinsky y colaboradores (49) describieron un método para determinar los fosfolípidos que contienen colina. El método se basa en la acción de la fosfolipasa D sobre los fosfolípidos, reacción que libera colina. Este compuesto es oxidado, por la colina-oxidasa, a betaína con la producción simultánea de peróxido de hidrógeno el cual se oxida a fenol: éste se acopla a la 4-aminofenazona produciendo un cromógeno rojo que se mide por espectrofotometría a 500 nm. La intensidad del color a 500 nm es directamente proporcional a la concentración de fosfolípidos que contienen colina. La sangre y la bilirrubina producen cierto grado de interferencia.

Dado que algunos autores consideran que la concentración de lecitina es una alternativa adecuada para evaluar la madurez pulmonar (50). Schosinsky y colaboradores hicieron un análisis comparativo de su método con la determinación de lecitina por un método enzimático, encontrando un coeficiente de correlación de 0,945. El método es sencillo, económico, preciso y requiere poco volumen de muestra, pero aún se necesita evaluar su utilidad clínica.

Recuento de Cuerpos Lamelares

Los CL tienen un tamaño similar al de las plaquetas por lo que puede determinarse su concentración en LA utilizando el canal de plaquetas de los contadores automáticos de hematología (51). El método fue descrito en 1989 por Dubin usando contadores hematológicos que registran un tamaño de partículas ≥ 1.7 fL (52). El recuento de CL puede compararse con las pruebas de absorbancia del LA debido a que la dispersión de la luz, causada por los CL en suspensión, es la responsable del color turbio del LA de los fetos maduros.

El recuento de CL no se afecta cuando el LA está contaminado con cantidades pequeñas de meconio, aunque aumenta falsamente cuando está presente una cantidad considerable (53). El recuento también aumenta falsamente con la presencia de moco (53) lo que limita su utilización en muestras obtenidas por vía vaginal. La sangre completa puede reducir falsamente el recuento de CL, mientras que la sangre lisada osmóticamente puede aumentarlo.

El recuento de LA no parece alterarse por la conservación refrigerada del LA hasta por dos semanas (54).

El resultado del recuento de CL se informa como número de CL/μL de LA. En general, un recuento > 50.000 CL/μL concuerda con una relación L/E > 2.0 en el 70% de los casos. Sin embargo, se han descrito varios puntos de corte para determinar madurez pulmonar fetal y, en consecuencia, diferentes características operativas de la prueba. Dubin (52) recomienda un punto de corte de 26.000 CL/μL para LA centrifugados y de 40.000 CL/Μl para LA no centrifugados; Lee y colaboradores (55) informaron una sensibilidad del 100% y una especificidad del 80% con un punto de corte de 50.000 CL/μL y, en nuestro medio, Cifuentes (56) informó un valor predictivo positivo del 94% y un valor predictivo negativo del 82% utilizando un punto de corte de 16.000 CL/μL Finalmente, un meta-análisis de Wijnberger LD y colaboradores (57) informó una sensibilidad entre el 71 y el 100% y una especificidad entre el 73 y el 100%.

Estos autores informaron que las curvas de las características operativas del receptor (curvas ROC) para la predicción del SDR del recién nacido, mostraban un desempeño ligeramente mejor del recuento de CL que la relación L/E (58)

El recuento de CL es una técnica sencilla, de bajos costos y con buenas características operativas, por lo que se ha considerado como la primera elección para el estudio de la madurez pulmonar fetal (58). No obstante, además de las esperadas diferencias en las características operativas obtenidas con distintas prevalencias y diversos puntos de corte, se han obtenido resultados discordantes según si hay o no centrifugación (58), cuando hay diferencias en las técnicas de centrifugación (59) y cuando se usan diferentes tipos de contadores de hematología para hacer el conteo de CL. Un estudio comparativo encontró que el Sysmex XE-2100 (Sysmex) mostró la mejor concordancia (86%) con el Coulter Gen-S (Beckman Coulter), seguido por el ADVIA 120 (Bayer Corporation) (78%), y que la concordancia del Celldyn 3500 (Abbott Laboratorios) con el Coulter Gen-S fue del 66% (59). Por estas razones se requiere que las instituciones investiguen las características operativas de la prueba y establezcan el punto de corte apropiado para su laboratorio.

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