Complicaciones Peritoneales por Cálculos Biliares, Material y Métodos
En el desarrollo de esta investigación se consideró una serie de variables, dependientes e independientes. Dentro de las primeras figuran las de tipo macroscópico, teniendo en cuenta la clasificación de las adherencias establecida por Swolin (39) en la siguiente escala:
0 | Sin adherencias |
1 | Adherencias laxas, separación espontánea |
2 | Adherencias firmes, separación por tracción |
3 | Adherencias densas, separación por disección |
Dentro de las de tipo microscópico se definieron y evaluaron hallazgos de microscopía de luz y electrónica en tres categorías: -leve, moderada, severa; y cinco subgrupos:
A. Inflamación. Presencia de abundante infiltrado polimorfonuclear como respuesta ante la injuria con participación de mecanismos celulares y humorales (Fig. 3).
B. Fibroblastos. Células mesenquimales responsables de la síntesis y mantenimiento del material extracelular: fibronectina, proteoglicanos, colágenos tipo I y III (Fig.4).
C. Neováscularización. Formación de estructuras vasculares como respuesta al daño celular como parte del mecanismo reparador (Fig. 5)
D. Fibrosis. Proceso de reparación y cicatrización caracterizado por aumento de tejido conectivo (Fig. 6).
E. Inflamación granulomatosa por cuerpo extraño. Inflamación crónica caracterizada por la presencia de linfocitos, histiocitos, células epitelioides, células gigantes de tipo cuerpo extraño (Fig. 7).
Dentro de las variables independientes se tomaron en cuenta dos grupos: las controladas y las estudiadas, así:
1. Controladas
* Especie, sexo, peso, talla, edad de los conejos.
* Tipo y dosis de antibiótico profiláctico.
* Tipo y dosis de sedación, analgesia, anestesia.
* Cantidad y clase de sutura utilizada.
* Cantidad y tipo de cálculos heterólogos.
* Tipo de procedimiento quirúrgico utilizado para alojar los cálculos.
* Cantidad y clase de alimentación en el postoperatorio.
* Tipo de coloraciones utilizadas para análisis histopatológico.
2. Estudiadas
* Peso
* Talla
* Perímetro abdominal
* Temperatura
* Frecuencia cardíaca
* Frecuencia respiratoria
* Densidad urinaria
* Ingesta
* Vómito
* Deposición
* Comportamiento
* Adherencias macroscópicas
* Adherencias microscópicas
Procedimientos
Se tomaron 10 conejos hembras, especie blanc.o común (criollo), de 3 meses de edad, con peso aproximado de 3,5 kg que fueron asignados en dos grupos (Fig. 8):
Grupo A: Estudio (con intervención): 5 conejos
Grupo B: Control (sin intervención): 5 conejos.
Todos los conejos fueron llevados a mini laparotomía con 6 horas de ayuno; la cirugía se llevó a cabo en las instalaciones de cirugía experimental de Johnson & Johnson en la Universidad de la Salle de Santafé de Bogotá y fue practicada por los residentes de cirugía involucrados en la investigación.
Se marcaron, pesaron, tallaron y controlaron signos vitales; se les rasuró el abdomen, 30 minutos antes de la intervención; fueron sedados con Midazolam a una dosis de 0.15 mg/kg de peso, vía s.c, y la analgesia con Fentanyl a una dosis de 0.1 mg/kg, vía s.c, 5 minutos antes del procedimiento.
Se utilizó Mefoxitin 13 mg/kg, vía i.m., como antibiótico profiláctico.
Se realizó una asepsia y antisepsia del campo operatorio con Iodopovidona espuma y solución durante 3 minutos. Bajo técnica estéril se colocaron los campos quirúrgicos de aislamiento, se aplicó anestesia local con Xilocaína al 1% sin pinefrina, en el sitio de la incisión, con una dosis máxima de 5 mg/kg; se practicó incisión aproximadamente de 1 cm de longitud sobre la línea media del hemiabdomen superior hasta identificar el peritoneo parietal; se realizó hemostasia y se incidió el peritoneo.
A los conejos del Grupo A (estudio) se les introdujo a la cavidad peritoneal y se dejaron abandonados fragmentos de aproximadamente 2 g de peso de cálculos biliares de origen humano, tipo mixto, tomados de una misma vesícula extraída en forma electiva por laparoscopia, 4 horas antés por colecistitis crónica y colelitiasis, con Gram de la bilis negativo para gérmenes, cuyos cálculos se tomaron y conservaron refrigerados a 4°C, con técnica estéril, en solución salina al 0.9% con 1 g de Mefoxitin por litro de solución.
A los conejos del Grupo B: (control) no se les introdujo ningún cuerpo extraño a la cavidad peritoneal.
El peritoneo parietal de todos los conejos fue cerrado con sutura continua de Vicryl 2-0; la piel se afrontó con puntos separados de Prolene 3-0.
El tiempo quirúrgico promedio fue de 10 mino y no se presentaron complicaciones durante los procedimientos.
Todos los animales fueron controlados por Veterinarios de la Universidad de La Salle, y alojados en el Bioterio de la misma institución, durante el período comprendido entre enero y marzo de 1994.
Se realizaron diez controles en los que se registraron las variables mediadas en formatos individuales diseñados para este fin, en los días O, 2, 3, 7, 15,30,45,60, 75, 90 del postoperatorio.
No se excluyó ningún conejo del estudio y no hubo mortalidad durante su observación.
Todos los animales fueron sacrificados el día 90° del postoperatorio y se les practicó laparotomía exploratoria, para registrar los hallazgos macroscópicos y clasificarlos según la escala de Swolin.
Se tomaron muestras de tejido de los sitios más representativos según los hallazgos macroscópicos en cada animal, que fueron conservados en formol al 10% y formaldehído al 10%, respectivamente, para estudio histopatológico de microscopía de luz y electrónica (Fig. 9). Se utilizaron técnicas de tinción de hematoxilina y eosina, tricrómico de Mallory. Las muestras fueron analizadas en el Departamento de Patología del Hospital Universitario de San Ignacio por el Residente involucrado y revisadas por el profesor asignado, quienes registraron los hallazgos en el formato diseñado para el estudio, utilizando el categorismo de leve, moderado, severo, y anotando la presencia de inflamación, fibroblastos, neovascularización, fibrosis e inflamacion granulomatosa por cuerpo extraño.
El procesamiento y análisis de los datos fue realizado por la unidad de Epidemiología Clínica del Hospital Universitario de San Ignacio.
Todas las variables dependientes e independientes por estudiar, se recolectaron en formatos individuales para cada animal codificados según el grupo al cual fueron asignados (estudio o control).
Se recolectaron estas medidas en una base de Datos D Base III Plus, y se asignaron códigos a las variables discretas tanto nominales como ordinales y se consignaron los valores de las variables continuas de intervalo y razón. Utilizamos el programa SPSS/PC (The statistical package lor IBM PC) (Figs. 10 y 11).
Para describir las variables continuas aplicamos medidas de tendencia central: media, desviación estándar.
Para describir las variables discretas se aplicaron proporciones.
Resultados
A. Variables independientes
No se observaron diferencias entre los dos grupos (estudio y control) en las variables estudiadas.
B. Variables dependientes
1. Hallazgos macroscópicos.
Grupo A: Estudio (cálculos heterólogos), 100% desarrollaron adherencias densas, (Tipo 3 de Swolin).
Grupo B: Control (sin cálculos), 0% desarrollaron adherencias (Tipo O de Swolin).
2. Hallazgos microscópicos. Grupo A: Estudio (cálculos heterólogos):
A. Inflamación 100%
40% Leve
40% Moderada
20% Severa
B. Fibroblastos 100%
60% Leve
20% Moderado
20% Severo
C. Neovascularización 100%
40% Leve
40% Moderada
20% Severa
D. Fibrosis 100%
60% Leve
0% Moderada
40% Severa
E. Granuloma por cuerpo extraño 60%
20% Leve
20% Moderado
20% Severo
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